氣相色譜儀毛細柱的安裝

檢查氣體過濾器、載氣、進樣墊和襯管等。

檢查氣體過濾器和進樣墊，保證輔助氣和檢測器的通氣暢通，如果以前做過較臟樣品或活性較高的化合物，需要將進樣口的襯管清洗或更換。

將螺母和密封墊裝在色譜柱上，并將色譜柱兩端小心切平，切面要平滑整齊。

將色譜柱連接于進樣口上。

色譜柱在進樣口中插入的深度應(yīng)根據(jù)所使用的GC儀器不同而定，正確合適的插入能最大可能地保證試驗結(jié)果的重現(xiàn)性。通常，色譜柱的入口應(yīng)保持在進樣口的中下部，即處于進樣針穿過隔墊完全插入進樣口后針尖與色譜柱入口相距1～2cm。避免用力彎曲擠壓毛細管柱，并小心不要讓標記牌等帶有鋒利邊緣的物品與毛細管柱接觸摩擦，以防毛細管柱斷裂受損。色譜柱正確插入進樣口后，將連接螺母擰上，擰緊后（用手擰不動了）用扳手再多擰1/4—1/2圈，保證安裝的密封程度。不緊密的安裝，不僅會引起裝置的泄漏，而且有可能對色譜柱造成永久損壞。

接通載氣

當色譜柱與進樣口接好后，通入載氣，調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速。將色譜柱的出口端插入裝有已烷的樣口瓶中，正常情況下可以看見瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡。如果沒有氣泡就要重新檢查載氣裝置和流量控制器等是否設(shè)置正確，并檢查整個氣路有無泄漏，待所有問題解決后，將色譜柱出口從瓶中取出，保證柱端口無溶劑殘留，再進行下一步的安裝。

將色譜柱連接于檢測器上

色譜柱與檢測器的連接安裝和所需注意的事項和色譜柱與進樣口連接大致相同。如果在應(yīng)用中系統(tǒng)所使用的ECD或NPD等，那么在老化色譜柱時，應(yīng)該將色譜柱與檢測器斷開，這樣檢測器可避免被污染。

確定載氣流量

再對色譜柱的安裝進行檢查。 注意：如果不通入載氣就對色譜柱進行加熱，會快速且永久性的損壞色譜柱。

色譜柱的老化

色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后，就可以對色譜柱進行老化，對色譜柱加熱至一恒定溫度，通常取其溫度上限。特殊情況下，可加熱至高于最高使用溫度10～20℃左右，但是一定不能超過色譜柱的溫度上限否則極易損壞色譜柱。當達到老化溫度后，記錄并觀察基線，初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升，在達到老化溫度后5～10min開始下降，并且會持續(xù)分鐘，當達到一個固定的值后就會穩(wěn)定下來。如果在小時后基線仍無法穩(wěn)定，或者在15～20分鐘后仍無明顯的下降趨勢，那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染。遇到這樣的情況，應(yīng)立即將柱溫降到40℃以下，盡快地檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問題，如果還是繼續(xù)老化，不僅對色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。

設(shè)置確認載氣流速

對于毛細管色譜柱使用載氣首選高純度氮氣或氫氣，載氣的純度最好大于99.95%，而其中的含氧量越小越好。如果您使用的是毛細管色譜柱，那么依照載氣的平均線速度（cm/s），而不是利用載氣流量（ml/min）來對載氣做出評價，因為柱效的計算采用的是載氣平均線速度。推薦平均線速度值：氮氣：10～20cm/s 氫氣：20～25cm/s

在載氣的管線中加入氣體過濾裝置不僅可以延長色譜柱壽命，而且很大程度地降低了背景噪音，建議最好安裝一個高容量脫氧管和一個載氣凈化器。使用ECD系統(tǒng)時，最好能在其輔助氣路中也安裝一個脫氧管。

柱流失檢測

在色譜柱老化過程結(jié)束后，采用程序升溫作一次空白試驗（不進樣），一般是以10℃/min從50℃升到最高使用溫度，達到最高使用溫度后保持10min，這樣我們就會得到一張流失圖。這些數(shù)值可以后作對比試驗，并且對實驗問題的解決有幫助。在空白試驗的色譜圖中，不應(yīng)該有色譜峰出現(xiàn)，如果出現(xiàn)了色譜峰，通常可能是從進樣口帶來的污染物。如果在正常的使用狀態(tài)下，色譜柱的性能開始下降，基線的信號值會增高。另外，如果在較低的溫度下，基線信號值明顯大于初始值，那么有可能是色譜柱和系統(tǒng)有污染

色譜柱常見的故障和注意事項

色譜柱斷裂

避免色譜柱接觸尖銳的邊角，并避免太緊纏繞或彎曲色譜柱。斷裂的色譜柱可以切掉部分或采用無死體積的接頭連接使用。

熱損壞

不要超過使用溫度上限（等溫上限是色譜柱能夠長期使用的溫度，程序升溫的上限是色譜柱在該溫度下工作5~10min）

氧化損壞

載氣流路中管路、接頭、進樣口、隔墊等的泄漏都會造成色譜柱暴露于氧氣中。預(yù)防措施是定期檢漏、更換隔墊、高質(zhì)量的載氣、安裝氧氣捕集阱、在載氣瓶使用完之前更換。

化學損壞

無機或礦物酸和堿是引起固定相化學損壞的主要原因。為了避免酸堿在柱前端積聚，可以安裝保護柱并定期截去柱頭一段。

色譜柱污染

毛細管柱拆下后應(yīng)該貯存在原來的盒子里，并用GC隔墊密封柱兩端，重新安裝時從柱頭截去2~4cm以確保隔墊碎屑不會堵塞在色譜柱內(nèi)。色譜柱使用中必須保證柱內(nèi)通有載氣，只有當柱箱、進樣口、檢測器降溫后才能關(guān)閉載氣。

色譜柱的維護保養(yǎng)

針對氣相色譜柱的維護保養(yǎng)，主要是對色譜柱進行老化。老化的目的有三個：

A、去除固定相表面不穩(wěn)定的流失碎片；

B、使固定液更加牢固、均勻的分布在載體表面；

C、可以去除色譜柱中殘留的污染物。

需要對色譜柱進行維護保養(yǎng)的幾種現(xiàn)象：

A、新的色譜柱在正式使用前需要進行老化；

B、當色譜柱使用很長時間，導(dǎo)致儀器基線變差，對檢測結(jié)果有影響時，需要進行老化；

C、當色譜柱放置很長時間，使用前也需進行老化；

D、若儀器沒有配備UPS不間斷電源，在分析過程中如遇突然斷電，可能會導(dǎo)致樣品殘留在色譜柱中，干擾下一次的樣品分析，使用前也需進行老化（色譜柱處于高溫時，停電導(dǎo)致斷開了載氣供給，會加速色譜柱填料的流失，尤其是對強極性的色譜柱，比如WAX色譜柱，大大減少了色譜柱的使用壽命，所以一般安裝時工程師會建議給儀器配備UPS不間斷電源，當市電斷電后，可以使用UPS不間斷電源讓儀器降溫關(guān)機，進而保護儀器和色譜柱）。

氣相色譜柱的維護

A、安裝完色譜柱后，都要在進樣前進行老化。具方法是，先通載氣，然后將柱溫從45℃左右以5-10℃/min的速率程序升溫到色譜柱的最高使用溫度以下30℃（如HP-5柱可到280℃）或者實際分析操作溫度以上30℃（如分析時用240℃，老化溫度應(yīng)為270℃），并在高溫時恒溫30到120min，直到所記錄的基線穩(wěn)定為止。如果基線難以穩(wěn)定，可重復(fù)進行幾次程序升溫老化，也可在高溫下恒定更長的時間。注意，一定要等到基線穩(wěn)定后，才可做空白運行或進樣分析。色譜柱使用一段時間后，柱內(nèi)會滯留一些高沸點組分，這時基線可能出現(xiàn)波動或出現(xiàn)鬼峰。解決此問題的辦法也是老化。

B、新購買的色譜柱一定要在分析樣品前先測試柱性能是否合格。具體辦法是按照出廠時的測試條件進行驗收，如不合格，可以退貨或更換新色譜柱，這樣做可以避免不必要的經(jīng)濟損失。

C、暫時不用的色譜柱從儀器上卸下后，柱兩端應(yīng)當用一塊硅橡膠（可利用廢進樣隔墊）堵上，并放在相應(yīng)的柱包裝盒中，以免柱頭被污染。

D、每次關(guān)機前都應(yīng)將柱箱溫度降到50℃以下，然后再關(guān)電源和載氣。溫度高時切斷載氣，可能會因空氣（氧氣）擴散進入柱管而造成固定液的氧化降解。

E、儀器有過溫保護功能時，每次新安裝了色譜柱都要重新設(shè)定保護溫度（超過此溫度值時，儀器會自動停止加熱），以確保柱箱溫度不超過色譜柱的最高使用溫度。

氣相色譜柱的保養(yǎng)

色譜柱都有一定的壽命，它與所分析的樣品狀況和維護情況有直接關(guān)系。柱壽命完結(jié)的主要標志是固定液流失太多而失去了分離能力，柱管堵塞或斷裂也是導(dǎo)致柱失效的原因。有時只是因為一些高沸點的極性化合物的吸附而使色譜柱喪失分離能力，這時可對其進行清洗和修理。具體辦法是先在高溫下老化柱子，用載氣將污染物沖洗出來；若柱性能仍不能恢復(fù)，就從儀器上卸下柱子，將柱頭截去10cm或更長（柱頭是最容易被污染的），再安裝上測試。這是常用的柱性能恢復(fù)措施。如果還不起作用，可再反復(fù)注射溶劑進行清洗，常用的溶劑依次為丙酮、甲苯、乙醇、氯仿和二氯甲烷。每次可進樣5-10μL，這一辦法常常能奏效。如果色譜柱性能還不好，就只有卸下柱子，用二氯甲烷或氯仿沖洗?？捎贸檎婵盏霓k法將溶劑從另一端吸入，也可用對溶劑瓶加壓的方法將溶劑壓入。溶劑用量依柱子的污染程度而定，一般20mL左右。如果這一方法仍不起作用，說明色譜柱應(yīng)該報廢了。需要說明，只有固定液交聯(lián)的色譜柱才可用此法清洗，否則會將固定液全部洗掉。

色譜柱色譜條件的應(yīng)用

柱載氣流量的選擇

通過毛細管柱的載氣流量要根據(jù)毛細管柱的柱長、柱徑、膜厚以及被分析物的組成等綜合因素設(shè)定。高流速雖然可以提高分析效率，但有時可能會因被測物與固定相之間交換不充分而降低柱效。因此，在實際分析中，流速的設(shè)定應(yīng)在滿足分離的前提下適當增加，以提高分析效率。對于氣相色譜-質(zhì)譜儀，還要考慮質(zhì)譜真空泵的抽氣量，氣流速大還會影響到靈敏度。某些檢測器，如電子捕獲檢測器，僅靠通過毛細管色譜柱的載氣流量無法滿足工作需求，因此，還需要補充加上尾吹氣。另外，有些廠家的儀器采用在毛細管柱的末端加上尾吹氣的設(shè)計，以減少擴散，改善色譜峰形，提高信噪比。

柱溫的選擇

柱溫是影響色譜分離和分析效率的最重要參數(shù)，所以要根據(jù)分析目的和被測物性質(zhì)，如：被測物的沸點、被測物極性、被測組分的多少，通過實驗優(yōu)化得到合適的柱溫。交聯(lián)型毛細管色譜柱相對而言柱流失比較少，可以在較高溫度下工作。分析中通常采用程序升溫模式，從而提高分離度和柱效。

初始溫度的選擇

初溫的確定取決于譜圖上最早流出峰的分離度，一般應(yīng)低于樣品中最低沸點組分的溫度。

升溫速率的選擇

升溫速率對色譜分離度和峰形的影響最大，對于多組分分析，可以設(shè)置多階、不同升溫速率的升溫程序，以得到最好的分離效果和峰形。

終點溫度的選擇

程序升溫最終溫度的確定主要取決于固定相和被測樣品中最高沸點的物質(zhì)。另外，對于基質(zhì)復(fù)雜的樣品，可以考慮在固定相規(guī)定最高溫度下適當提高溫度（但接質(zhì)譜最好不要這樣做），并且在此溫度下適當延長保持時間。

進樣方式的選擇

對于毛細管色譜分析有多種進樣方式可以選擇。殘留分析應(yīng)選擇不分流進樣或柱上進樣，純度分析則多選擇分流進樣，分流比根據(jù)被測物含量而定。但分流進樣對定量精度會有影響，分流比越大定量精度越差。