什么是色譜柱的分配系數(shù)和容量因子?二者是什么關(guān)系?
在色譜儀分析檢測過程中,分配系數(shù)和容量因子一定程度上展現(xiàn)色譜柱的柱效,了解影響色譜柱分離度的因素,有助于有效地使用和保養(yǎng)色譜柱,提高色譜柱分離度和色譜儀檢測靈敏度。
分配系數(shù)是指在一定溫度下,待測樣品在兩相間達到分配平衡時,在固定相與流動相中的濃度之比。分配系數(shù)與組分、流動相和固定相的溫度、壓力有關(guān)。在流動相、固定相、溫度和壓力一定條件下,樣品濃度很低時,分配系數(shù)只取決于組分的性質(zhì),而與濃度無關(guān)。在大多情況下,分配系數(shù)隨著濃度的增大而減小,這時色譜峰為拖尾峰;而有時隨著溶質(zhì)濃度增大,分配系數(shù)也增大,這時色譜峰為前延峰。因此,只有盡可能減少進樣量,使組分在柱內(nèi)濃度降低,分配系數(shù)恒定時,才能獲得正常峰。
在同一色譜條件下,樣品中分配系數(shù)值大的組分在固定相中滯留時間長,后流出色譜柱;分配系數(shù)值小的組分則滯留時間短,先流出色譜柱?;旌衔镏懈鹘M分的分配系數(shù)相差越大,越容易分離,因此混合物中各組分的分配系數(shù)不同是色譜分離的前提。
分配系數(shù)K,容量因子k與保留時間之間有如下關(guān)系:k=t'R/t0,t'R=tR-t0。上式說明容量因子的物理意義:表示一個組分在固定相中停留的時間(t'R)是不保留組分保留時間(t0)的幾倍。k=0時,化合物全部存在于流動相中,在固定相中不保留,t'R=0;k越大,說明固定相對此組分的容量越大,出柱慢,保留時間越長。
容量因子與分配系數(shù)的不同點是:k取決于組分、流動相、固定相的性質(zhì)及溫度,而與體積Vs、Vm無關(guān);K除了與性質(zhì)及溫度有關(guān)外,還與Vs、Vm有關(guān)。由于t'R、t0較Vs、Vm易于測定,所以容量因子比分配系數(shù)應(yīng)用更廣泛。
分配系數(shù)K和分配比k的關(guān)系: K=k·β
β為相比率,是反映各種色譜柱柱形特點的又一個參數(shù),β=Vm/Vs,Vm為流動相的體積,即死時間(t0)與流動相流速的乘積,Vs為色譜柱中固定相的體積。對填充柱其β值一般為6~35,對毛細管其β值為60~600。
在液相色譜儀中,固定相確定后,分配系數(shù)主要受流動相的性質(zhì)影響。在試驗中主要靠調(diào)整流動相的組成配比及pH值,以獲得組分間的分配系數(shù)差異及適宜的保留時間,達到分離的目的。
容量因子是待測樣品在兩相間達到分配平衡時,在固定相與流動相中的量之比。因此容量因子也稱質(zhì)量分配系數(shù)。容量因子的物理意義:表示一個組分在固定相中停留的時間是不保留組分保留時間的倍數(shù)。分配系數(shù)為0時,化合物全部存在于流動相中,在固定相中不保留,停留的時間為0;分配系數(shù)越大,說明固定相對此組分的容量越大,出柱慢,保留時間越長。
容量因子與分配系數(shù)的不同點是:分配系數(shù)取決于組分、流動相、固定相的性質(zhì)及溫度,而與體積無關(guān);分配系數(shù)除了與性質(zhì)及溫度有關(guān)外,還與體積有關(guān)。由于保留時間比體積更易于測量,所以容量因子比分配系數(shù)應(yīng)用更廣泛。更為詳細的氣相色譜儀、液相色譜儀技術(shù)資訊請登錄山東譜析科學(xué)儀器有限公司網(wǎng)站了解查詢。
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