棒狀薄層色譜儀分析中操作小知識
2021-07-14 10:08:07來源：admin
棒狀薄層色譜儀分析中操作小知識
1、怎樣提高點樣準確度
在棒狀薄層色譜儀分析中點樣是造成TLC定量誤差的主要來源。譜析儀器通過試驗可以認為定量毛細管較適合較小體積的點樣；進樣器適合較大體積的點樣。這主要是因為進樣器受小氣泡、溶液回爬現(xiàn)象的影響較大。為避 免不同定量毛細管間的點樣誤差、建議一整塊的棒狀薄層色譜柱上用同一只定量毛細管。但應注意在換樣品時，應將毛細管用超聲波或不同極性溶劑清洗干凈。在制備樣品時，溶樣溶劑黏度不能過高，以便于點樣；溶劑沸點過低則進樣體積易變，過高則會改變展開劑組成。較好TLC樣點的原點一般底邊距1～5cm。
2、展開劑的選擇
TLC與HPLC相比,一個較好的優(yōu)點就是流動相的選擇具有大的靈活性。流動相的選擇的目的是使絕大部分樣品的RF值位于0.1–0.7之間并達到較好的分離，與此對應的是流動相要有適當?shù)膹姸群徒M成。流動相強度越大，溶質(zhì)RF值越大，但很可能 降 低 分離能力；另外單一溶劑很難分離較復雜的混合物，根據(jù)相似相溶原理，要使用多元溶劑體系。一般展開劑體系選擇如下：根據(jù)分離樣品性質(zhì)、薄層色譜柱性質(zhì)選擇一個二元溶劑體系，通過調(diào)節(jié)溶劑比例以尋求適合RF值，適合的RF值找到后，再尋求極性參數(shù)相同的二元溶劑體系兩個，以這三個組成為三點組成一個三角形，則可看到：三角形頂點是二元體系，邊是三元體系，三角形內(nèi)是四元體系，并且極性一致，可根據(jù)幾何原理得出任一點組成。這種方法較為直觀，也較簡單。
3、TLC的通用顯色方法
理想的顯色希望靈度高、ban點顏色穩(wěn)定、ban點與背景間的對 比 度好、ban點的大小及顏色的深度與物質(zhì)的量成正比。在樣品組成并不wan全已知的情況下，通用顯色方法顯得尤qi重要。通用顯色法主要有：
（1）紫外照射法：方便，不破壞樣品；棒狀薄層色譜儀常用方法。
（2）碘蒸氣法：通用 性 強，與紫外法結(jié)合靈敏度高于該兩法單獨使用；
（3）熒光試劑：制造熒光背景，使原來紫外下無熒光物質(zhì)被鑒別，有熒光物質(zhì) 較 明 顯；
（4）硫酸溶液：對絕大多數(shù)有 機 物 有 效，但有破壞性。
