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液相色譜梯度洗脫中柱溫的影響

2021-02-23 08:32:42來源:admin
許多色譜工作者在操作液相色譜時,色譜柱是在室溫環(huán)境下工作的。如果實驗室的溫度能保持不變的話,不會有什么大問題。但大多數(shù)的工作環(huán)境溫度是不斷變化的,因此若想將在某實驗室開發(fā)的一種液相色譜方法應(yīng)用到其他實驗室的話,溫度的差別就會引起較復(fù)雜的問題。溫度的影響在所有的色譜分析方式中都是存在的,譜析色譜小編就來討論液相色譜方法中的梯度洗脫方式受溫度影響的問題。
 
等度保留
 
大多數(shù)色譜工作者知道等度洗脫時溫度會影響保留時間。圖1顯示了三個不同溫度下的分離結(jié)果。我們發(fā)現(xiàn)當(dāng)溫度升高時所有的色譜峰都前移了,等度洗脫時一般溫度每升高一攝氏度保留時間會縮短1-3%,在圖1中,保留時間變化率約為2%/℃。
 
擁有溫控系統(tǒng)的實驗室一般都有全天候溫控設(shè)置,但這種設(shè)置可能引起室溫顯著變化,這對整夜運行的色譜系統(tǒng)就會有一些影響,例如,我們實驗室的夜間溫度就設(shè)為4~7℃。在不同的季節(jié),實驗室的夜間溫度可能比正常工作日的溫度高或低,這種溫度的變化就會使色譜峰離開“保留時間窗”,造成連續(xù)進樣中產(chǎn)生一系列的無效數(shù)據(jù)。
 
還有一個可能的溫度影響因素就是色譜儀器在實驗室的位置。當(dāng)色譜柱正對著空調(diào)的送風(fēng)口時,雖然整個實驗室的溫度非常穩(wěn)定,但色譜系統(tǒng)的溫度就會不斷的變化。這就是我們要使用柱溫箱的原因之一。
 
梯度保留
 
溫度變化對梯度洗脫和等度洗脫的影響趨勢是一樣的,溫度變化對梯度洗脫的影響要小于對等度洗脫的影響(假定本例具有普遍代表意義)。即便如此,若梯度洗脫時不控制溫度的話,保留值一般都會有較大的變化。
 
柱溫在液相色譜梯度洗脫過程中扮演了一個重要的角色,首先,提高柱溫可以縮短保留時間,其次,我們看到柱溫還可以影響選擇性,最后,溫度的不平衡會導(dǎo)致峰扭曲變形。這些提醒我們,如果想得到穩(wěn)定可靠的分離結(jié)果,色譜柱的溫度變化是不可忽視的。

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