色譜儀廠家為您解析高效液相色譜儀梯度洗脫
2020-02-07 09:47:20來(lái)源：admin
液相色譜儀的梯度洗脫和氣相色譜儀中的程序升溫類(lèi)似，給色譜分離帶來(lái)很大的方便，已成為高效液相色譜儀不可缺少的部分。
所謂梯度洗脫，就是有兩種或兩種以上不同極性的溶劑，在分離過(guò)程中按照一定程序連續(xù)地改變，以改變流動(dòng)相的配比和極性。通常用的流動(dòng)相一般為二元溶劑。在梯度運(yùn)行期間，強(qiáng)溶劑B（如反相HPLC中的甲醇）的濃度增大。一般以這種溶劑中強(qiáng)溶劑B的體積比（%B）表示。
現(xiàn)在有許多實(shí)驗(yàn)室在使用液相色譜儀的梯度洗脫技術(shù)，這是因?yàn)?strong>梯度洗脫可克服等度洗脫的一些弱點(diǎn)：
1 避免早流出峰分離度不好的缺點(diǎn)；
2 避免晚流出峰峰變快峰高降低的缺點(diǎn)；
3 避免混合物容量因子范圍寬時(shí)分析時(shí)間長(zhǎng)的缺點(diǎn)；
4 避免保留時(shí)間長(zhǎng)的組分污染色譜柱的缺點(diǎn)。
梯度洗脫液相色譜儀適合于以下幾種情況的待測(cè)樣品分析：
1 具有較寬容量因子范圍的樣品.
2 大分子樣品，相對(duì)分子質(zhì)量大于1000的，尤其是生物樣品。
3 樣品中含有高保留時(shí)間的干擾成分，在一次分析中如不把它洗脫出去，就會(huì)污染色譜柱，并影響下一次分析。
4 即使在液相色譜儀使用等度時(shí)也可以使用梯度洗脫選擇流動(dòng)相的比例。
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